192合成儀是指用來合成多肽的儀器,因?yàn)槎嚯暮铣傻牟襟E很繁瑣,又很耗時(shí),開發(fā)了自動(dòng)多肽合成儀。儀器以固相合成為反應(yīng)原理,在密閉的防爆玻璃反應(yīng)器中使氨基酸按照已知順序不斷添加、反應(yīng)、合成,操作Z終得到多肽載體。軟件不僅能自動(dòng)顯示合成難易程度的預(yù)測(cè)圖,還能根據(jù)合成方案計(jì)算合成所需要的溶劑與試劑量。計(jì)算并提供合成試劑的濃度,包括每個(gè)單體或者氨基酸應(yīng)放置的位置。系統(tǒng)還監(jiān)測(cè)液體輸送、反應(yīng)溫度、清洗和排空反應(yīng)器。當(dāng)合成完成,軟件會(huì)自動(dòng)清洗合成中用到的容器和管線,以備下次使用。
192合成儀的具體合成由下列幾個(gè)循環(huán)組成:
1、去保護(hù):Fmoc保護(hù)的柱子和單體必須用一種堿性溶劑去除氨基的保護(hù)基團(tuán)。
2、激活和交聯(lián):下一個(gè)氨基酸的羧基被一種活化劑所活化?;罨膯误w與游離的氨基反應(yīng)交聯(lián),形成肽鍵。在此步驟使用大量的超濃度試劑驅(qū)使反應(yīng)完成。循環(huán):這兩步反應(yīng)反復(fù)循環(huán)直到合成完成。
3、洗脫和脫保護(hù):多肽從柱上洗脫下來,其保護(hù)基團(tuán)被一種脫保護(hù)劑洗脫和脫保護(hù)。
192合成儀引物的保存方法:
引物合成后,經(jīng)過一系列處理和純化步驟,旋轉(zhuǎn)干燥而成無色或白色絮狀干粉。
干粉:運(yùn)輸時(shí)常溫運(yùn)輸,零下二十度可以保存一年。
儲(chǔ)存液:配好后分裝成幾管,避免反復(fù)凍融零下二十度可以保存半年。
工作液:常規(guī)使用,四度保存,也可零下二十度保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
修飾熒光引物:需要避光保存,盡快使用為宜。